WB實驗代測

免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)，它是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。

Western blotting服務實驗流程

u 細胞及組織蛋白質(zhì)抽提；

u 蛋白質(zhì)定量；

u 變性聚丙烯酰胺不連續(xù)凝膠電泳(SDS-PAGE)；

u 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜；

u 膜的封閉；

u 一抗、二抗孵育；

u 結(jié)果檢測：化學發(fā)光法檢測，X 膠片曝光顯影；

u 數(shù)據(jù)分析；

代測說明：

1、有趨勢，不需做預實驗。

2、沒有趨勢，要求做預實驗。

3、WB檢測里包含了蛋白提取。

4、實驗結(jié)束，返還膠圖。

5、一個指標只能跑一張膜

WB實驗代測的優(yōu)勢：

1、western免疫印跡是將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產(chǎn)物，可通過融合部分的抗體檢測。